Staphylococcus aureus: generalidades, mecanismos de patogenicidad y colonización celular / Staphylococcus aureus: generalities, mechanisms of pathogenicity and cell colonization

Resumen Staphylococcus aureus se caracteriza por ser la principal causa de bacteriemia nosocomial en el mundo, debido al incremento en la resistencia, a los diferentes factores de patogenicidad y virulencia y la expresión de una gran variedad de proteínas las cuales pertenecen a las moléculas de la matriz adhesiva (MSCRAMM), presentes en la superficie de la bacteria cuya función es la colonización e invasión celular al hospedero y favorecer la formación de biopelícula, El conjunto de estos mecanismos de patogenicidad y virulencia, le permiten a la bacteria persistir en el huésped y en el ambiente, sobreviviendo a factores adversos, al sistema inmune y a los antimicrobianos.

Abstract Staphylococcus aureus is a microorganism characterized by being the main cause of nosocomial bacteremia in different places of the world, due to the different virulence and pathogenicity factors. One of the most important is the biofilm formation, which greatly favors bacterial resistance. For the adhesion of the biofilm to biotic and abiotic surfaces, the microbial surface components recognizing adhesive matrix molecules (MSCRAMM), these proteins play a key role in host cell colonization and invasion by the bacteria.

Risk assessment for preterm delivery using the fetal fibronectin test associated with the measurement of uterine cervix length in symptomatic pregnant women / Avaliação do risco para parto pré-termo utilizando o teste da fibronectina fetal, associado à medida de comprimento de colo uterino, em gestantes sintomáticas

Abstract Objective To analyze the use of the measurement of uterine cervix length (MUCL) and the fetal fibronectin (fFN) rapid test as predictors of preterm delivery (PTD) in symptomatic pregnant women assisted at the Santa Casa de Misericórdia de Sobral Maternity Hospital. Methods This was a prospective and analytic study involving 53 parturients assisted between September of 2015 and July of 2016; the participants were between 24 and 34 weeks of gestational age (GA) and presented complaints related to preterm labor (PTL) prodromes. Vaginal secretion was collected for fFN testing, and the MUCL was obtained via transvaginal ultrasonography. Results A total of 58.49% of the subjects showed MUCL < 25 mm, and 41.51% were positive in the fFNrapid test.Atotal of 48 patients were followed-up until their delivery date, and 54.17% resulted in PTL. The relative risk (RR) for PTD in patients with MUCL < 25 mm was 1.83 (p = 0.09, 0.99-3.36, 95% confidence interval [CI]), with a mean time before delivery of 2.98 weeks. Based on fFN positive results, the RR was 3.50 (p = 0.002, 1.39- 8.79, 95%CI) and themean time until delivery was 1.94weeks. The RRwas 2.70 (p = 0.002, 1.08-6.72, 95%CI) when both tests were used. The RR of PTD within 48 hours, and 7 and 14 days were, respectively, 1.30 (p = 0.11, 95% CI 1.02-1.67), 1.43 (p = 0.12, 95% CI % 0.99-2.06), and 2.03 (p = 0.008, 95% CI 1.26-3.27), when based on the MUCL, and 1.75 (p = 0.0006, 95% CI 1.20-2.53), 2.88 (p = 0.0001, 95% CI, 1.57-5.31), and 3.57 (p = 0.0002, 95% CI 1.63-7.81) when based on positive fFN results. The RR at 48 hours and 7 and 14 days considering both tests was 1.74 (p = 0.0001, 95% CI 1.14-2.64), 2.22 (p = 0.0001, 95% CI 1.22-4.04), and 2.76 (p = 0.0002, 95% CI 1.27-5.96), respectively. Conclusion In symptomatic pregnant women, we concluded that the MUCL < 25 mm associated with positive fFN rapid test indicate increased the risk for PTD. Further studies with larger sample sizes could contribute in supporting the results presented in the current study.

Resumo Objetivo Analisar a utilização da medida do comprimento do colo uterino (MCCU), e do teste da fibronectina fetal (FNf) como preditores do trabalho de parto pré-termo (PPT), em gestantes sintomáticas, atendidas na Maternidade da Santa Casa de Misericórdia de Sobral. Métodos Foi realizado umestudo prospectivo e analítico, envolvendo 53 parturientes atendidas no período de setembro de 2015 a julho de 2016, com idade gestacional (IG) entre 24 e 34 semanas que tiveram queixas relacionadas a pródromos de trabalho de parto prematuro (TPP), sendo realizada coleta de secreção vaginal para FNf e MCCU por via ultrassonográfica transvaginal. Resultados Um total de 58,49% das pacientes tinham MCCU < 25 mm, e 41,51% tiveram teste rápido de fFN positivo. Foi feito o acompanhamento de 48 pacientes, com 54,17% de PPTs. O risco relativo (RR) para PPT com MCCU < 25 mm foi de 1,83 (p = 0,09, 0,99-3,36, intervalo de confiança [IC] 95%), com média de tempo até o parto de 2,98 semanas. Para fFN, o RR foi de 3.50 (p = 0.002, 1.39-8.79, IC 95%) e a média até o parto foi de 1,94 semanas. Quando os dois testes forampositivos, o RR foi de 2,70 (1,08-6,72). Para a MCCU, o RR para PPT em 48 horas, 7 e 14 dias foram 1,30 (p = 0.11, 95% IC 1.02-1.67), 1,43 (p = 0.12, 95% CI % 0.99-2.06) e 2,03 (p = 0.008, 95% IC 1.26-3.27), respectivamente. Para FNf, em 48 horas, 7 e 14 dias foi de 1,75 (p = 0.0006, 95% IC 1.20-2.53, 2,88 (p = 0.0001, 95% IC, 1.57-5.31) e 3,57 (p = 0.0002, 95% IC 1.63-7.81) respectivamente. Com os dois testes, o RR em 48 horas, 7 e 14 dias foi 1,74 (p = 0.0001, 95%IC 1.14-2.64), 2,22 (p = 0.0001, 95% IC 1.22-4.04) e 2,76 (p = 0.0002, 95% IC 1.27-5.96) respectivamente. Conclusão Em mulheres grávidas sintomáticas, concluímos que a MCCU < 25 mm e o teste rápido de FNf positivo indicam aumento do risco de PPT. Outros estudos com tamanhos de amostra maiores podem contribuir para apoiar os resultados apresentados no presente estudo.

Parto pretérmino: causas y medidas de prevención

Preterm birth is the final common pathway of a series of different physiopathological processes, so it is considered a syndrome. Spontaneous preterm birth represents two thirds of preterm deliveries. Prevention can be primary or secondary, and is basically focused on prediction, which is currently done by risk calculators that combine medical history, cervical length and fetal fibronectin. Vaginal progesterone reduces the rate of spontaneous preterm birth to 35-40%, if used from week 16 through week 34.

El parto pretérmino es la vía final común de una serie de procesos fisiopatológicos diferentes, por lo que constituye un síndrome. El parto pretérmino espontáneo representa las dos terceras partes del parto pretérmino. Su prevención puede ser primaria o secundaria, y se centra básicamente en la predicción, la que actualmente se realiza mediante calculadoras de riesgo que combinan factores de historia clínica, longitud cervical y fibronectina fetal. La progesterona vaginal reduce la tasa de parto pretérmino espontáneo en 35 a 40%, si se administra desde las 16 hasta las 34 semanas.

El parto pretérmino: herramientas predictivas y preventivas en la práctica clinica / Preterm birth: predictive and preventive tools in clinical practice

Despite advances in both neonatal care and our understanding of the pathophysiology of the condition as a whole, preterm birth is a phenomenon that continues to have significant impact globally. It remains the leading cause of perinatal morbidity and mortality worldwide, and the prevalence is increasing. Not only does it carry significant social cost, preterm birth places huge economic burden on the healthcare system. It is increasingly recognised that preterm birth is a multifactorial syndrome, rather than a single condition and we have seen a number of exciting advances in predictive and preventative tools for clinical practice. The ability of quantitative fetal fibronectin to predict spontaneous preterm birth in both high and low risk women has been one of these recent promising developments. Exploration continues into the potential for quantitative fetal fibronectin to be used in synergy with transvaginal ultrasound measurement of cervical length to improve predictive accuracy. Developments focus on enabling clinicians to predict risk at the point of care. Research continues to explore cervical cerclage, progesterone and the Arabin pessary as prophylactic interventions for women at risk of preterm birth, with increasing evidence for their potential role. Latest exploration of reactive management for imminent preterm birth is altering our clinical approach and is likely to improve outcomes. This review article will discuss some of the recent developments we have seen in this exciting area

A pesar de los avances en la atención prenatal y en la comprensión de la fisiopatología del cuadro como un todo, el parto pretérmino es un fenómeno que continúa provocando un impacto significativo global. Continúa como la causa principal de morbilidad y mortalidad perinatal en todo el mundo y su prevalencia está en aumento. No solamente conlleva un costo social significativo, sino que el parto pretérmino produce una carga económica importante para el sistema de salud. Cada vez más, hay datos que indican que el parto pretérmino es un síndrome multifactorial, más que un cuadro único y nosotros documentamos un gran número de avances en las herramientas predictivas y preventivas en la práctica clínica. Uno de estos avances más recientes es la capacidad de la fibronectina fetal cuantitativa para predecir un parto pretérmino espontáneo, tanto en mujeres de alto riesgo como de bajo riesgo. La investigación continúa hacia el uso potencial de la fibronectina fetal cuantitativa en sinergia con la medición de la longitud cervical por ecografía transvaginal para mejorar la precisión predictiva. Los avances están dirigidos a que los clínicos puedan predecir el riesgo en el lugar de atención. Las investigaciones continúan con la evaluación del cerclaje cervical, la progesterona y el pesario de Arabin como intervenciones profilácticas para las mujeres en riesgo de parto pretérmino, con pruebas crecientes para su papel potencial. Las exploraciones ulteriores con terapia reactiva para el parto pretérmino inminente alteran nuestro enfoque clínico y probablemente mejoren los desenlaces clínicos. Esta revisión analizará algunos de los avances recientes observados en esta área apasionante

Análise da influência de proteínas da matriz extracelular e fibrinogênio na formação de biofilme por cepas de Enterococcus faecalis isoladas de infecção endodôntica primária / Analysis of influence of extracellular matrix proteins and fibrinogen in biofilm formation by Enterococcus faecalis strains isolated from primary endodontic infection

Enterococcus faecalis é um patógeno oportunista com peculiar potencial para a manutenção da infecção perirradicular endodôntica após o preparo químico-mecânico do sistema de canais radiculares. Adicionalmente, possui aptidão para desenvolver-se em biofilme e apresenta em sua parede celular adesinas compatíveis com substratos colagênicos, como a composição da matriz extracelular da dentina e dos túbulos dentinários. Esse estudo propôs-se a caracterizar geneticamente 23 amostras de E faecalis isoladas de infecções endodônticas primárias através da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR, do inglês Polymerase Chain Reaction) e investigar a influência de COL I (colágeno tipo I), FN (fibronectina) e fibrinogênio (FBG) na formação de biofilme em superfície abiótica. Assim, após a sensibilização de ¾ dos poços de placas de poliestireno estéreis com 50 µl da solução de proteína de matriz (COL I, FN e FBG) na concentração de 1mg/ml, transferiu-se 50µl de suspensão bacteriana (1,5 x 108 bact/mL) correspondente a cada amostra, de modo a preencher tanto os poços sensibilizados como os não sensibilizados. A quantificação da formação de biofilme foi realizada por meio de leitura por densidade óptica, cujos resultados revelaram que houve formação de biofilme por todas as em superfície abiótica, porém com diferentes graus de intensidade. Todas as cepas foram identificadas geneticamente como Enterococcus faecalis e a presença do gene gelE foi dominante. Contudo, nenhuma apresentou amplificação para os genes esp e agg, e, apesar de 73,9% das amostras amplificarem para o gene ace, apenas 2 cepas (P7 e P75) isoladas de infecções endodônticas primárias tiveram aumento de formação de biofilme na presença de COL I (P<0,05). Embora a presença de FBG não forneça subsídio estatisticamente significante para a formação de biofilme, COL I e FN influenciaram na redução da formação do biofilme para a maior parte das amostras. É possível que a capacidade de formação de biofilme inerente ao E. faecalis e a afinidade para FN e COL I através da expressão gênica de ace contribuam substancialmente para a manutenção desse micro-organismo no ambiente radicular mesmo após o tratamento endodôntico minucioso.

Enterococcus faecalis is an opportunistic pathogen with peculiar potential to maintain the periradicular endodontic infection even after chemical-mechanical preparation of the root canal system. In addition, it has the ability to develop into biofilms and presents in your cell wall adhesins compatible with collagenous substrates, as the composition of the extracellular matrix of the dentine and dentinal tubules. This study aims to characterize genetically 23 samples of E. faecalis isolated from primary endodontic infections by Polymerase Chain Reaction (PCR) technique and investigate the influence of collagen type I (COL I), fibronectin (FN) and fibrinogen (FBG) in biofilm formation on abiotic surface. Thus, after the sensitization of ¾ the wells of sterile microtiter plates with 50 ul of matrix protein solution (COL I and FN FBG) at a concentration of 1mg / ml, was transferred 50mL of bacterial suspension (1.5 x 108 bact / ml) corresponding to each sample in order to fill both wells sensitized and non-sensitized. Quantification of biofilm formation was performed by optical density, so the results showed that there were biofilm formation by all strains on abiotic surface, but with different degrees of intensity. All strains were genetically identified as Enterococcus faecalis and the presence of gelE gene was prevalent. However, none showed amplification for the esp and agg gene, and, while 73.9% of the samples for amplifying ace gene, only 2 strains (P7 and P75) isolated from primary endodontic infections they had increased biofilm formation in the presence of COL I (P <0.05). Although the presence of FBG no provides significant support for the biofilm formation, COL I and FN were relevant influence in the reduction of biofilm formation for most of the samples. It is possible that the biofilm-forming ability inherent in E. faecalis and affinity for FN and COL I through ace gene expression contribute substantially to maintain of this microorganism in the root environment even after thorough endodontic treatment.

Propriedades adesivas a substratos abióticos e bióticos, invasão e indução de apoptose celular de Corynebacterium pseudodiphtheriticum / Adhesive properties to abiotic and biotic substrates, invasion and induction of apoptosis of Corynebacterium pseudodiphtheriticum

A ocorrência de fenótipos multirresistentes de Corynebacterium pseudodiphtheriticum e sua associação a infecções graves, com elevada mortalidade em pacientes imunocomprometidos, aliados ao escasso conhecimento da virulência e patogenia destas infecções, motivou esta pesquisa, que teve como objetivo investigar mecanismos de virulência e resistência microbiana deste agente entre pacientes de um hospital universitário brasileiro. Um total de 113 amostras de C. pseudodiphtheriticum identificadas por métodos bioquímicos convencionais e sistema API-Coryne isoladas de pacientes de diferentes grupos etários. Os micro-organismos eram, em sua maioria, relacionados a infecções no trato respiratório (27,45%), urinário (29,20%) e sitios intravenosos (18,60%) e cerca de 32,70% das amostras foram provenientes de pacientes com pelo menos uma das condições predisponentes: insuficiência renal; transplante renal, tuberculose em paciente HIV+, câncer, cirrose hepática, hemodiálise e uso de cateter. As amostras testadas revelaram-se multirresistentes sendo a maioria resistente à oxacilina, eritromicina e clindamicina. A adesão das cepas ao poliestireno e ao poliuretano indicou o envolvimento de hidrofobicidade da superfície celular na fase inicial da formação de biofilmes. O crescimento subsequente conduziu à formação de microcolônias, agregados bacterianos densos incorporados na matriz exopolimérica rodeada por espaços vazios, típica de biofilmes maduros...

The occurrence of multiresistant phenotypes and associated with severe infections, with high mortality in immunocompromised hosts due to Corynebacterium pseudodiphtheriticum, allied to little known about virulence and pathogenesis these infections, led to present investigation. The investigation aims to examine the virulence mechanisms and resistance to antimicrobial agents of C. pseudodiphtheriticum among patients with bacterial infections at a Brazilian teaching hospital. A total of 113 C. pseudodiphtheriticum strains identified by conventional biochemical methods and API-Coryne System were recovered from patients from different age groups. Micro-organisms were mostly related to infections in the respiratory tracts (27.45%), urinary (29.20%) and intravenous sites (18.60%) and approximately 32.70% samples were obtained of patients presenting at least one of the pre-disposing conditions: end-stage renal disease; renal transplant; AIDS and Mycobacterium tuberculosis infection; cancer, hepatic cirrhosis; haemodialysis and catheter use. Antimicrobial susceptibility tests identified multiresistant phenotypes. Most strains were resistant to oxacillin, erythromycin and clindamycin. Adherence to polystyrene and polyurethane indicated the involvement of cell surface hydrophobicity in the initial stage of biofilm formation. Further growth led to the formation of dense bacterial aggregates embedded in the exopolymeric matrix surrounded by voids, typical of mature biofilms...

Infecção genital e marcadores preditivos do parto prematuro / Genital infection and preterm birth predictive markers

Apesar dos avanços na área da Obstetrícia, a prematuridade ainda é a principal causa de morbidade e mortalidade neonatal. Esforços continuam sendo feitos na busca de marcadores que possam predizer tal evento e, assim, evitar o parto prematuro. A presente revisão abordou a relação da infecção genital com a prematuridade e sua influência nos resultados dos principais indicadores preditivos do parto prematuro, bem como a eficácia da antibioticoterapia. Os estudos revisados sugerem que o tratamento da vaginose bacteriana relaciona-se a resultados satisfatórios para a prevenção da prematuridade somente se realizado na primeira metade da gestação. A alteração dos testes preditivos não indica, por si só, o uso de antibióticos.

Despite advances in the field of Obstetrics, prematurity is still responsible for the leading cause of neonatal morbidity and mortality. Efforts are still being made in the search for markers that can predict such an event and thus prevent premature delivery. This review explores the relationship of genital infection with preterm birth and its influence on the results of the main preterm birth predictive markers, as well as the effectiveness of antibiotics. The revised studies suggest that treatment of bacterial vaginosis relates to satisfactory results for the prevention of preterm performed only if the first half of pregnancy. The change of predictive tests not indicates, by itself, the use of antibiotics.

Fibronectina fetal como predictor del trabajo de parto en mujeres mexicanas / Fetal fibronectin as a predictor of labor in Mexican women

Introducción: la presencia de fibronectina fetal en secreciones vaginales ha sido considerada como un predictor de trabajo de parto en embarazo de término y de pretérmino. Objetivo: evaluar la validez predictiva de la fibronectina en embarazadas que acudieron al Hospital General SSH de Pachuca, México. Metodología: se incluyeron pacientes embarazadas que acudieron al hospital para control de su embarazo. Se determinó la fibronectina fetal en todas las participantes y se dio un seguimiento hasta el inicio del trabajo de parto. Resultados: participaron un total de 148 pacientes, siendo un grupo con 53 pacientes con menos de 37 semanas de gestación (SG) y otro grupo con 95 pacientes con 37 ó más SG. En general, la prueba mostró una sensibilidad promedio de 72,5 por ciento y una especificidad promedio de 82,9 por ciento para ambos grupos. Conclusión: sobre la base de los resultados obtenidos, recomendamos utilizar la prueba de fibronectina en embarazadas a partir de las 32 semanas de gestación, tanto en los servicios de urgencias como de consulta externa.

Background: The presence of fetal fibronectin in vaginal secretions has been regarded as a predictor of labor in pregnant term and preterm. Objective: For this reason the purpose of this study was to evaluate the predictive validity of fibronectin in pregnant women who attended the General Hospital SSH Pachuca, Hidalgo, Mexico. Methodology: We included pregnant patients admitted to hospital for pregnancy control. Fetal fibronectin was determined in all participants and then followed until the onset of labor. Results: A total of 148 patients participated. One group with 53 patients less than 37 weeks gestation, and another group of 95 patients with 37 or more weeks gestation. In general, the test showed an average sensitivity of 72.5 percent and specificity 82.9 percent average for both groups. Conclusion: Based on these results, we recommend using fibronectin test in pregnant women after 32 weeks of gestation, both in emergency departments and outpatient clinics.

Carcinoma de nasofaringe: análise da importância prognóstica da imunoexpressão da galectina-3 e proteínas de matriz / Nasopharyns carcinoma: analysis of prognostic importance of immunoexpression of galectin-3 and matrix proteins

Objetivo: Estudar a expressão da Galectina-3 e a distribuição das proteínas de matriz, laminina, fibronectina e colágeno IV, em 30 amostras teciduais de carcinoma de nasofaringe (CNF) e correlacionar com as características clínicopatológicas, agressividade tumoral e sobrevida dos indivíduos. Forma de estudo: clínico retrospectivo. Casuística e Material: Foram estudadas por método imunohistoquímico 30 amostras teciduais de 26 pacientes com diagnóstico de Carcinoma de Nasofaringe (CNF), cujos blocos parafinados estavam arquivados no Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu, UNESP. As lâminas foram revisadas e reclassificadas de acordo com a classificação de 2005 da WHO. As proteínas de matriz e a galectina-3 foram analisadas por método imunohistoquímico. Resultado: A análise mostrou que a media etária foi de 48anos, com o pico de prevalência entre 60 a 69 anos, e predominância do sexo masculino de 2:1. O Carcinoma Escamoso Não Ceratinizante Indiferenciado (CENCI) foi mais comuns em 23 amostras (76,7%), o Carcinoma Escamoso Não Ceratinizante Diferenciado (CENCD) em 4 amostras (13.3%) e Carcinoma Escamoso Ceratinizante (CEC) em 3 amostras (10,0%). A expressão da laminina que normalmente é restrita à parede dos vasos e na lâmina própria, estava muito aumentada na matriz das células neoplásicas em 23 amostras (76,7%); a fibronectina foi positiva em 13 amostras (43%) e a galectina-3 foi positiva em 21 amostras (70%). Tivemos correlação positiva da laminina, fibronectina e galectina-3 em 7 amostras (23,3%) e entre laminina e galectina-3 em 11amostras (36,6%)...

Objectives: Analyze the expression of galectin-3 and distribution of matrix proteins, laminin, fibronectin and collagen IV, in 30 paraffinated samples of nasopharynx carcinoma(NFC); and correlate the to clinicopathological characteristics, as tumor aggressiveness and survival of individuals. Study design: retrospective clinical study. Methods: The analyses were performed by immunohistochemistry in 30 tissue samples of 26 patients diagnosed with NPC were archived in the Pathology Department of Botucatu of Medical School, São Paulo State University, UNESP, Brazil. The slides were reviewed and reclassified according to the WHO classification of 2005. The matrix proteins and galectin-3 analyses were performed by immunohistochemistry. Results: The analysis showed that the patients mean age was 48 years-old, with the age peak prevalence was from 60 to 69 years-old, with male predominance of 2:1. The undifferentiated non-keratinized squamous cell carcinoma (UNKSCC) was predominant in 23 samples (79%), differentiated non-keratinized squamous cell carcinoma (DNKCC) was found in 4 samples (13.3%) and keratinized squamous cell carcinoma (KCC) was found in 3 samples (10%). The laminin expression, which is normally restricted to the vessel walls and lamina propria, was increased in the neoplasic cell matrix in 23 samples (76.7%). Fibronectin was positive in 23 samples (43%). Galectin-3 was observed in 21 samples (70%). Seven cases showed positive correlation between all three proteins. Eleven cases presented positive correlation of laminin and galectin-3 immunoexpression. There was one case of KCC in recurrence of DNKCC...

Papel das hemaglutininas 67-72p de Corynebacterium diphtheriae na ligação a proteínas plasmáticas, superfícies celulares, invasão e indução de apoptose / Role of haemagglutinins 67-72p de Corynebacterium diphtheriae in binding to plasma proteins, cell surfaces, invasion and induction of apoptosis

Corynebacterium diphtheriae pode ser isolado tanto de quadros de difteria clássica, quanto de infecções sistêmicas, como endocardite. O fibrinogênio (Fbn) e a fibronectina (Fn) são glicoproteínas presentes na matriz extracelular de tecidos conjuntivos. A influência destas proteínas na patogênese das infecções locais e invasivas causadas por C. diphtheriae é objeto de estudo devido ao fato do bacilo diftérico poder ser encontrado em lesões nas quais o Fbn e a Fn são predominantes, incluindo a pseudomembrana diftérica e vegetações cardíacas presentes na endocardite infecciosa. São crescentes as evidências de que o C. diphtheriae pode, além de aderir, ser internalizado por células em cultura. No presente estudo, investigou-se a participação de C. diphtheriae e das proteínas de superfície 67-72p na aderência à Fn e ao Fbn de plasma humano e a eritrócitos. A aderência às células HEp-2 e internalização também foram analisadas. A participação de 67-72p nos mecanismos de morte celular foi avaliada através das colorações por Azul de Tripan e 4'6-diamidino-2-fenil indol (DAPI), pelo ensaio de redução utilizando dimetil-tiazol-difenil tetrazólio (MTT) e por citometria de fluxo. As 67-72p foram extraídas da superfície da amostra toxigênica C. diphtheriae subsp. mitis CDC-E8392 através de processos mecânicos e precipitação com sulfato de amônio saturado. Análises por SDS-PAGE e immunoblotting detectaram a presença das bandas protéicas de 67 e 72kDa nas amostras toxinogênicas e atoxinogênicas analisadas, as quais pertenciam aos biotipos fermentador e não fermentador de sacarose. C. diphtheriae foi capaz não só de formar agregados na presença de plasma de coelho, mas também de converter Fbn em fibrina independentemente da presença do gene tox. No entanto, a amostra atoxinogênica ATCC 27010 (tox-) foi menos aderente ao Fbn do que a homóloga ATCC 27012 (tox+). A interação bacteriana com eritrócitos foi inibida somente pela Fn. Ligações entre Fn e/ou Fbn com 67-72p foram ...

Corynbacterium diphtheriae have been isolated from classical diphtheria and systemic infections such as endocarditis. Fibrinogen (Fbn) and fibronectin (Fn) are high molecular-weight glycoproteins that may be found in extracellular matrix of connective tissues. Their influence in the pathogenesis of local and in invasive C. diphtheriae infection is object of interest due to the fact that diphtheria bacilli is recovered from lesions where such proteins are predominant, including pharyngeal pseudomembrane and valve heart vegetations in infectious endocarditis. There is growing evidence that C. diphtheriae may adhere to and be internalized by cells in culture. The present study investigated the participation of C. diphtheriae strains and 67-72p, a surface protein, in adherence to human plasma Fn, Fbn, erityrocytes, adherence to and internalization by HEp-2 cells. The participation of 67-72p in promoting cell death was evaluated by the Trypan blue, DAPI staining methods, methylthiazole tetrazolium (MTT) reduction assay and flow cytometry. The 67-72p was extracted from C. diphtheriae subsp. mitis CDC-E8392 toxigenic strain, by mechanical process and ammonium sulfate fractionation. SDS-PAGE and immunoblotting analysis detected the polypeptide bands of 67 and 72 kDa in all toxigenic and nontoxigenic strains from both sucrose-fermenting and non-fermanting biotypes. Diphtheria bacilli were capable to both form bacterial aggregates in rabbit plasma and to convert Fbn to fibrin independently to the presence of tox gene, albeit the ATCC 27010 (tox-) strain was less adherent to Fbn than the paental strain ATCC 27012 (tox+). Bacteria-erythrocytes interaction was inhibited only ...

Estudo imuno-histoquímico da tenascina-C e fibronectina em lesões proliferativas não-neoplásicas de mucosa oral / Immunohistochemistry study of tenascin-C and fibronectin in noneoplasic proliferative lesions of oral mucosa

As lesões proliferativas não-neoplásicas correspondem a respostas teciduais decorrentes de estímulos crônicos de longa duração. Dentro deste grupo enquadra-se o granuloma piogênico, lesão periférica de células gigantes, fibroma ossificante periférico e hiperplasia fibrosa. O objetivo da pesquisa foi observar através da técnica da imuno-histoquímica, se existem diferenças na intensidade, padrão, continuidade e localização da expressão das proteínas da matriz extracelular representadas pela tenascina-C e fibronectina, com a finalidade de contribuir para o melhor entendimento dessas lesões. Utilizou-se 05 casos de cada entidade patológica supracitada, além de 05 espécimes de mucosa oral normal com finalidade comparativa. Observou-se a expressão da tenascina-C e fibronectina na interface epitélio-conjuntivo, bem como na proximidade de vasos sanguíneos nas hiperplasias fibrosas inflamatórias, lesão periférica de células gigantes e fibromas ossificantes, evidenciando o seu envolvimento nos processos de remodelação tecidual. Nossos resultados demonstram que a tenascina-C e a fibronectina são componentes teciduais importantes no desenvolvimento dessas patologias.

The no neoplasic proliferative lesions correspond the tissue reactive originating of long duration chronic stimulus. In this group frame pyogenic granuloma, peripheral giant cell granuloma, peripheral fibroma ossifying and fibrous hyperplasia. The aim of the research was observe, using immunohistochemical technique, if to exist differences in intensity, pattern, continuity and localization of the expression of the proteins of the matrix extrecellar, represent by tenascin-C and fibronectin, with finality of contribute for a best knowledge these lesions. Evaluated 05 cases of each lesion, as well as 05 specimen of normal oral mucosa with comparative finality. It was observed expression in interface conjunctive-epithelium, as well as in the proximity of blood vesseis in the fibrous hyperplasia, peripheral giant cell lesion and ossifying fibroma, evidencing your involvement in the process of improvement of the tissues. Our results demonstrate that those proteins can participate in the development these pathologies, fortifying as soon, your involvement in the process of improvement of the tissues.

Factores circulantes de injuria endotelial y procesos subendoteliales en mujeres postmenopáusicas sanas / Endothelial injuring factors and subendothelial events in healthy postmenopausal women

La concentración elevada de lipoproteínas aterogénicas con apo B en mujeres posmenopáusicas (MPM), es un componente importante del mecanismo multifactorial causante de la enfermedad coronaria. En MPM sanas (n=30) en comparación con premenopáusicas (MpreM) (n=28), se evaluó el perfil lipoproteico incluyendo apoproteínas A-I y B, LDL pequeña y densa, composición y oxidabilidad de LDL, proteína transportadora de colesterol esterificado y lipasa hepática. Se determinaron los siguientes factores emergentes: homocisteína, fosfolipasa A2, ferritina, PCR-hs (alta sensibilidad) y fibronectina proveniente de la matriz extracelular. La insulino-resistencia fue evaluada por la circunferencia de cintura, el índice HOMA y el índice triglicéridos/colesterol-HDL. El índice de riesgo apo B/apoA-I fue significativamente mayor en MPM (p<0,0001). MPM presentaron mayor proporción de LDL pequeña y densa, la cual correlacionó con el aumento de actividad de lipasa hepática (p<0,005), y con marcadores de insulino-resistencia (p<0,05). Fosfolipasa A2 (p<0,05), homocisteína (p<0,005), ferritina (p<0,0001), PCR-hs (p<0,005) y fibronectina (p<0,05)) fueron mayores en MPM. La oxidabilidad de LDL no mostró diferencias significativas pero correlacionó positivamente con LDL pequeña y densa (p<0,01), fosfolipasa A2 (p<0,05), homocisteína (p<0,05), PCR-hs (p<0,04), fibronectina (p<0,05) y cintura (p<0,02). Luego de ajustar por la condición menopáusica, edad y cintura, la oxidabilidad de LDL permaneció asociada con LDL pequeña y densa (b:0,36, p=0,027), homocisteína (b:0,36, p<0,038), fibronectina (b:0,41 p=0,05) y cintura (b:0,35, p=0,047). En este estudio, la interacción de factores de riesgo aterogénico clásicos y no tradicionales sugiere una secuencia de eventos que comienzan con la injuria endotelial causada por homocisteína y LDL pequeña y densa, que penetra en subendotelio donde su oxidación es favorecida por la homocisteína. Se produciría un proceso inflamatorio, que cursa con aumento de PCR y ferritina. La fosfolipasa A2, proveniente de macrófagos, atravesaría el endotelio unida a la LDL modificada, y promueve la liberación de fibronectina desde la matriz extracelular. La estrecha interacción entre la injuria endotelial, inflamación e insulino-resistencia se observaría desde estadíos subclínicos de aterosclerosis en MPM sanas.

In postmenopausal women (PMW), high concentrations of atherogenic apoB lipoproteins is an important component of the multifactorial mechanism underlying a higher risk of coronary artery disease, as compared with premenopausal women (PreMW). Lipoprotein pattern, including apopoproteins A-I and B, LDL chemical composition and small dense LDL (sdLDL), hepatic lipase activity, circulating cholesterol transfer protein and LDL oxidability were assessed in PMW (n=30) in comparison to PreMW (n=28). The following endothelial injuring factors were measured: homocysteine, lipoprotein binding phospholipase A2 (LpPLA2), ferritin, hs-CRP and fibronectin coming from extracellular vascular matrix. Insulin-resistance was evaluated by waist circumference, HOMA and triglyceride/HDL-cholesterol. PMW showed higher apoB/apoA-I (p<0.0001) and a higher proportion of sdLDL which showed significant correlations with the increase in hepatic lipase activity (p<0.005) and insulin-resistance markers (p<0.05). LpPLA2 (p<0.05), homocysteine (p<0.005), hs-CRP (p<0.005), fibronectin (p<0.05) and ferritin (p<0.0001) were elevated in PMW. LDL oxidability showed no differences between groups, but was positively correlated with waist (p<0.02), homocysteine (p<0.05), fibronectin (p<0.05), hs-CRP (p<0.04), LpPLA2 (p<0.05) and sdLDL (p<0.01). After adjusting by age, menopausal condition and waist, LDL oxidability remained associated with homocysteine (b: 0,36) p<0,038), sdLDL (b: 0.36, p=0.027), waist (b: 0.35, p=0.047) and fibronectin (b: 0,41 p=0.05). In this study, the interaction of classic and emerging atherogenic risk factors would suggest a sequence of events starting with endothelial damage caused by homocysteine and sdLDL, promoting its passage into the subendothelial space where it is oxidatively modified, enhanced by homocysteine. The above mentioned inflammatory process takes place with an increase in circulating hs-CRP and ferritin. LpPLA2, coming from macrophages, passes through the endothelium bound to modified LDL, promoting a release of fibronectin from the subendothelial extracellular matrix. Results suggest that the close interaction among endothelial injury, inflammation and insulin resistance can be observed since subclinical atherosclerosis states in healthy PMW.